提起细胞培养，相信很多小伙伴们都遇到过培养液中的“小黑点”，因无法确定它的身份而头痛不已。本期亚科因细胞小课堂将为大家揭秘这些黑点究竟是什么，帮助您快速上手开展实验。细胞培养中出现的小黑点可能由多种原因引起，常见的包括以下几种情况：

l 细胞碎片：细胞在生长、分裂或死亡过程中可能会产生碎片，这些碎片在显微镜下可能呈现为小黑点。

l 血清中的沉淀：血清中的某些成分可能会形成沉淀，表现为小黑点。

l 细菌污染：如果细胞培养受到细菌污染，细菌可能会以小黑点的形式存在，且通常会伴有培养液浑浊和pH值改变。

l 支原体污染：支原体污染相对较难察觉，有时也会表现为小黑点，同时细胞生长可能会受到抑制，形态发生变化。

l 黑胶虫污染：这是一种未知的生物污染，形态类似小黑点，能运动。

要确定小黑点的具体原因，需要结合细胞的生长状态、培养液的变化以及进一步的检测（如细菌培养、支原体检测等）来综合判断。

那如何有效预防细胞培养中的小黑点污染呢？

1.严格无菌操作

l 操作前用 75%酒精擦拭超净工作台台面。

l 实验过程中，手和器具不能接触非无菌区域。

l 培养瓶、移液管等器具要严格灭菌。

2.细胞培养用品的质量控制

l 选择优质的血清，使用前进行过滤除菌。

l 确保培养基的质量，严格按照说明书进行配制和储存。

3.定期检测和维护培养设备

l 定期对超净工作台进行高效过滤器的检测和更换。

l 保证培养箱的温度、湿度和二氧化碳浓度稳定且适宜，定期清洁消毒。

4.细胞来源的可靠性

l 确保细胞株来源正规，无潜在污染。

l 新引进的细胞株应进行严格的检测和鉴定。

5.预防支原体污染

l 定期对细胞进行支原体检测。

l 实验过程中使用支原体抑制剂。

6.规范实验操作

l 避免细胞培养瓶长时间敞口操作。

l 传代操作时动作轻柔，减少对细胞的损伤。

7.实验环境的清洁

l 细胞培养室定期进行彻底的清洁和消毒，包括地面、墙壁和天花板。

8.人员培训

l 对实验人员进行严格的细胞培养技术培训，强化无菌意识。

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